目的：

    HIV 相关淋巴瘤（HRL）的发病率已超过卡波西肉瘤，成为 HIV 相关肿瘤中发病率最高的疾病， 年发病率在HIV感染者中达到 （100~300）/10万，是非 HIV感染人群的 50~100 倍，已成为 HIV/AIDS 患者的重要死因。而HIV相关弥漫大B细胞淋巴瘤（HIV-DLBCL）是最常见的病理学类型。目前HRL发病机制仍不清楚，本研究以HIV-DLBCL为代表，旨在探讨HRL的可能发病机制。

方法：

     1.对HIV-DLBCL 和 non-HIV-DLBCL患者病变淋巴结进行mRNA-seq（各10例）、10×单细胞转录组测序（各1例），筛选差异表达基因行基因功能富集分析，并分析潜在的maker gene（HMGB2）。

     2.用qPCR法分别检测反应性增生（10例）、non-HIV-DLBCL患者（30例）和HIV-DLBCL患者（30例）淋巴结标本中的HMGB2表达，得到HMGB2在各组间的表达差异；探讨HMGB2表达差异对HIV-DLBCL患者EFS、OS的影响。

    3. 在HIV-DLBCL患者原代肿瘤细胞中过表达/敲减HMGB2后，检测并分析HMGB2对肿瘤细胞增殖、凋亡、PI3K/AKT/mTOR信号通路以及Warburg效应的影响，以探讨HMGB2在HIV-DLBCL中的生物学功能。

    4. 通过HitPredict数据库预测和免疫共沉淀，获得可能与 HMGB2 结合的蛋白，并进行验证。

结果：

    1. mRNA-seq及10×单细胞转录组测序结果均提示，与对照组相比，HIV-DLBCL 患者肿瘤细胞的差异基因在PI3K/AKT/mTOR、NF-κB、 JAK/STAT3 通路显著富集；maker gene 分析发现高迁移率蛋白 B2（HMGB2） 在该组样本中异常高表达。

    2. qPCR验证结果表明HMGB2 基因仅在 HIV-DLBCL 患者中高表达，且是不良预后因素。

    3. HIV-DLBCL患者原代细胞中HMGB2 过表达后，能促进肿瘤细胞的增殖、侵袭和迁移，抑制凋亡，显著上调PI3K/AKT/mTOR 通路中的 p-AKT 和 p-mTOR蛋白，增加葡萄糖的摄取和乳酸的生成，上调糖酵解相关酶 PKM2、 LDHB 和 HK2 的表达；而将HMGB2敲减后，mRNA-seq结果显示调控Warburg效应的多种因子均显著下调。

    4. 免疫共沉淀方法确定了 U2 小核 RNA 辅助因子 2（U2AF2） 是 HMGB2 高度可信的结合蛋白，qPCR及Western blot法验证后得到HMGB2 过表达对 U2AF2 的 mRNA 表达无显著影响，但能明显提高 U2AF2 的蛋白表达水平，提示 HMGB2 可能更多的作用于 U2AF2 的翻译后水平。

结论：

     本研究发现HIV-DLBCL的发病机制可能是：肿瘤细胞通过高表达HMGB2 并正向调控 U2AF2 稳定性进而上调其表达， 通过激活 PI3K/AKT/mTOR 信号通路来增强 Warburg 效应， 最终促进 HIV-DLBCL 的发生发展。