目的

胸腺瘤是胸腺上皮细胞分化而来的一种罕见的恶性肿瘤，具有组织学异质性，病理类型中A型预后较好，B型可表现为浸润生长，并累及邻近组织或器官。目前治疗方式以手术为主，晚期或复发患者需要化疗或放疗，且治疗疗效不理想，新的治疗方式亟待探索。随着二代测序（NGS）技术不断发展，恶性肿瘤的治疗模式已从单纯化疗向精准靶向和免疫治疗模式转化，本研究将通过二代测序技术检测胸腺瘤患者的基因突变，免疫组化检测胸腺瘤标本PD-L1表达，结合TCGA数据库数据信息，分析胸腺瘤的基因突变特点、免疫指标与临床病理特征相关性和对预后的影响，为探索胸腺瘤的靶向及免疫治疗提供科学依据。

方法

研究对象为2012-2019年期间在天津医科大学肿瘤医院接受手术治疗并且病理确诊为B型胸腺瘤患者。通过查阅电子病历系统及电话随访获得患者临床病理特征，包括性别、年龄、吸烟史、WHO 组织分型、临床分期及总生存期（Overall survival，OS）。对收集的胸腺瘤组织标本使用二代测序技术（NGS）对520个肿瘤相关基因进行检测同时采用免疫组化技术检测样本的PD-L1表达情况。同时通过癌症基因组图谱（TCGA）数据库收集胸腺瘤患者基因突变信息，将结果与我院胸腺瘤患者进行对比，同时使用Fisher精确检验和Wilcoxon-Mann-Whitney检验将基因突变状态、PD-L1与患者的临床病理特征进行比较；应用Pearson检验探究病理特征相关性；采用Kaplan-Meier方法进行生存分析。

结果

共收集送检我院B型胸腺瘤术后样本共150例，剔除样本质控不合格，共成功检测91例纳入研究进行基因检测，81例完成PD-L1检测。临床病例特征：男性47例，女性44例，中位年龄53.00岁；有吸烟史的患者30例，无吸烟史患者61例；有恶性肿瘤家族史的患者12例，无肿瘤家族史的患者79例。病理组织分型按1999年WHO标准，B1型16例，B1-B2混合型22例，B1-B3混合型2例，B2型18例，B2-B3混合型14例，B3型19例。临床分期按照2017年第八版TNM分期，I期68例，II期2例，III期10例，IV期11例。B1阳性的患者年龄显著更低（P＜0.01），B3阳性的患者分期越晚（P＜0.01）。TCGA数据库中总计123例胸腺瘤患者，筛选其中非亚裔患者共计108例含WES检测结果，患者中位年龄60岁，男性56例，女性52例。

我院B型胸腺瘤基因突变主要为TP53（n=8，突变率8.8%）、BRCA1（n=7，突变率7.7%）、PTCH1（n=6，突变率6.6%）且均为散发变异，无热点富集，PTCH1基因突变与肿瘤大小、B3分型和TNM分期相关（P<0.05）。TCGA组患者检出高频突变GTF2I（n=52，突变率48.2%），其次为HRAS（n=9 8.3%）、MUC16（4.6%）。TP53基因突变在我院胸腺瘤和TCGA组中均验证为与较差预后相关（P＜0.05）。GTF2I基因的突变在DFS上有显著更优的趋势（P＜0.05），但在OS上不显著（P＞0.05）。我院胸腺瘤81例患者PD-L1表达量呈阳性（TPS＞0）为60例，占比74.1%，PD-L1高表达（TPS≥50）的患者27例，占33.3%。B2亚型以及T分期较高的患者PD-L1的表达量显著更高。PD-L1表达与胸腺瘤预后无明显相关性（P＞0.05）。

结论

1. 与其他病理类型相比，B1阳性的患者年龄显著较低，B3阳性的患者临床分期较晚。

2. B型胸腺瘤基因突变复杂，无驱动基因及热点富集，较高频基因突变包括TP53、BRCA1、PTCH1，存在TP53基因突变的患者比TP53野生型患者预后差。TCGA数据库中，胸腺瘤中存在高频基因变异GTF2I，存在该突变的患者与野生型相比有更长的DFS。

3. PTCH1基因突变更容易发生在肿瘤较大、TNM分期较晚和B3分型的患者中，推测PTCH1基因突变可能与恶性程度高相关。

4. 74.1%的胸腺瘤患者PD-L1表达阳性，33.3%的胸腺瘤患者的PD-L1呈高表达，B2型及T分期较高的胸腺瘤患者PD-L1的表达水平更高，胸腺瘤的PD-L1表达水平不影响其预后OS。