目的：

肿瘤浸润调节性T细胞（Treg）介导了胃癌免疫耐受，如何有效的通过靶向 Treg 细胞抑制肿瘤生长成为目前免疫治疗研究热点。YAP1蛋白特异性高表达于Treg细胞，在维持Treg的免疫耐受功能中发挥重要作用，然而其调控Treg功能的具体机制仍待进一步阐明。

方法：

流式细胞术检测对比胃癌肿瘤及癌旁组织浸润Treg中YAP1的表达差异情况。利用YAP-KO转基因小鼠与野生型小鼠检测比较YAP1功能缺失对于Treg免疫抑制功能的影响。利用RNA-seq数据分析YAP1-cKO Treg中基因差异变化。体外实验检测抑制YAP1功能后Foxp3及IL-17a的变化。由于RNA-seq提示YAP1-cKO Treg中TNFα相关通路变化差异显著，因此在抑制YAP1基础上给与TNFα同步刺激后检测IL-17a的表达。体外实验进一步探索验证YAP1对TNFR2的调控关系。

结果：

胃癌肿瘤浸润 Treg中YAP表达明显高于肿瘤浸润效应CD4+ T细胞（Teff细胞）以及癌旁组织中Treg。体外共孵抑制实验提示YAP1-KO Treg免疫抑制功能明显低于野生型Treg细胞，提示YAP1在维持Treg免疫抑制功能中发挥重要作用。RNA-seq数据分析提示YAP1缺失造成Treg向Th17-like表型转化，体外实验证实抑制YAP1功能后Treg中Foxp3表达降低，IL-17a表达增加。考虑YAP1作为转录共激活因子发挥作用，利用Jaspar数据库对比分析考虑YAP 对于 Foxp3的调控不是直接发挥作用的，同时测序结果，我们利用TNFα进一步处理 Treg细胞，可见TNFα能够部分逆转YAP1功能受损之后Treg向Th17-like 表型的转化。由于Treg以表达TNFR2为主，因此TNFα主要通过其受体TNFR2发挥作用。进一步研究发现，靶向YAP1能够降低TNFR2表达，因此靶向YAP1能够通过调控 TNFR2促进Treg向Th17-like Treg转化，导致其免疫抑制功能受损。

结论：胃癌肿瘤浸润Treg高表达YAP1，YAP1对于维持Treg免疫抑制功能发挥重要作用。靶向YAP1导致Treg向Th-17 like表型转化，削弱其免疫抑制功能，其机制可能是通过下调TNFR2的表达进而降低Foxp3的表达促进Treg向Th-17 like表型转化。