嵌合抗原受体T细胞免疫疗法（Chimeric Antigen Receptor T-Cell Immunotherapy，CAR-T）是将CAR分子的高度特异性和T细胞对靶细胞的细胞毒性相结合的一种方法：从患者外周血中分离的T细胞通过基因重组，再经过体外培养，最后输注回患者体内。这种疗法可以通过特异性结合的方式行使杀灭肿瘤细胞的功能。

    目前，CAR-T疗法在血液肿瘤中取得了一定的成功。但在治疗过程中，CAR-T疗法仍存在许多问题，例如可能引起细胞因子释放综合征（CRS）、免疫效应细胞相关神经毒性综合征（ICANS），以及在实体瘤中的治疗效果不佳。

    CAR-T细胞疗法中主要发挥功能的是被激活的T细胞，因此CAR-T细胞长期接触肿瘤细胞表面递呈的抗原也会发生耗竭，影响“超级细胞”CAR-T的杀伤效果。寻找抗T细胞耗竭的方法来延长CAR-T细胞的作用时间似乎已经成为增强CAR-T疗法效果的一大重要途径。目前，在改善CAR-T细胞耗竭领域，研究人员发现，可以通过阻滞抑制性受体、抑制免疫抑制细胞、抑制免疫抑制因子、抑制相关转录因子、改善T细胞代谢、修饰基因整合位点等方式来延缓其耗竭，进而增强CAR-T细胞的杀伤靶细胞功能。此外，当一些细胞因子存在时，T细胞的耗竭似乎可以被改善，从而增强CAR-T细胞抗肿瘤效果。但直接加入外源性的细胞因子可能导致免疫细胞被过度激活，进而导致细胞因子大量释放，产生细胞因子风暴。因此，如何控制细胞因子发挥作用，成为了亟需解决的问题。

    活化T细胞核因子（NFAT）是一种转录因子，它受Ca²⁺和Ca²⁺/钙调蛋白依赖性钙调磷酸酶的调节。静息细胞中的NFAT蛋白处于磷酸化状态存在于细胞质中，受到刺激后，它们被钙调神经磷酸酶去磷酸化，转移到细胞核中，具有转录活性，从而提供细胞内的Ca²⁺信号转导和基因表达。

    当CAR-T细胞表面抗体识别并结合肿瘤细胞表面特异性抗原后，CAR-T细胞激活，促进Ca²⁺内流，使得细胞中游离的磷酸化活化T细胞核因子（NFAT）去磷酸化入核，诱导下游细胞因子表达。细胞因子作用于CAR-T细胞，促进细胞增殖，抑制细胞凋亡，延长CAR-T细胞存活时间，提升CAR-T细胞抗肿瘤能力。本研究拟利用钙离子依赖性转录因子NFAT，构建增强抗肿瘤效果的CAR-T系统。