目的 探讨母乳源发酵乳杆菌CECT5716防治新生儿坏死性小肠结肠炎（necrotizing enterocolitis, NEC）的作用及潜在机制。

方法 （1）构建NEC小鼠模型，灌胃给予发酵乳杆菌CECT5716。采用H&E染色评估肠道病变程度以及隐窝数量与分布；采用TUNEL染色、Ki67免疫组化检测肠道细胞凋亡与增殖水平；采用Western blot检测屏Ecad及Occludin评估肠道屏障功能的变化；采用免疫荧光检测Lgr5及Lysozyme评估肠道干细胞和潘氏细胞数量与分布情况；采用qPCR检测Lgr5及Olfm4等肠道干细胞标志基因的表达情况；采用Western blot检测Wnt/β-catenin信号通路的变化。（2）构建NEC体外类器官模型，给予发酵乳杆菌CECT5716共培养。采用肠类器官表面积检测评估类器官分化能力；采用免疫荧光检测Lgr5及Lysozyme评估肠道干细胞和潘氏细胞数目；采用EdU染色检测隐窝增殖能力；采用qPCR检测Lgr5及Olfm4等肠道干细胞标志基因的表达。（3）使用LC-MS法对发酵乳杆菌CECT5716的上清进行代谢组学检测，寻找调控Wnt/β-catenin信号通路的靶标，并进行体内体外水平验证。

结果 （1）与NEC组相比，发酵乳杆菌CECT5716干预后新生小鼠一般情况好转，存活率提高，肠道组织损伤减轻；肠道上皮增殖水平增高、凋亡水平明显降低；屏障蛋白Ecad和Occludin的表达升高；肠道干细胞和潘氏细胞数目明显增多，Lgr5、Olfm4、Ascl2的基因表达也明显增高；此外，Wnt/β-catenin信号通路也明显激活。（2）与LPS组相比，发酵乳杆菌CECT5716共培养可恢复肠类器官的分化能力。出芽增多、类器官的表面积增加；肠类器官干细胞和潘氏细胞数目显著上调；肠上皮增殖能力增强，Lgr5、Olfm4、Ascl2的基因表达也明显增高。（3）共轭亚油酸（Conjugated linoleic, CLA）是差异明显的的代谢产物之一，体内外水平验证发现CLA刺激Wnt信号通路明显增强，同时Lgr5、Olfm4、Ascl2基因表达也明显增高。

结论 母乳源发酵乳杆菌CECT5716通过代谢产物CLA激活Wnt/β-catenin信号通路驱动肠隐窝干细胞再生修复NEC肠道损伤。