类风湿关节炎（Rheumatoid arthritis ，RA)是一种炎症性疾病，会导致关节严重软骨退化和滑膜损伤，具有多种全身影响。既往研究表明，滑膜成纤维细胞（fibroblast-like synoviocytes，FLS） 在 RA 的发病机制中起关键作用。适当调节 FLS 功能是治疗这种疾病的有效方法。这些细胞表现出独特的侵袭性特征，并在疾病发展和进展中发挥积极作用。FLS 细胞产生大量基质金属蛋白酶 （MMP），包括 MMP1、MMP3 和 MMP13，可破坏关节组织的结构，使 FLS 能够侵入。同时，FLS 还分泌几种促炎细胞因子和趋化因子，如 IL-1β、IL-6 和 IL-8，这些因子会加重 RA 的病理过程。因此，适当调节 FLS 功能被认为是 RA 治疗的有效方法。Methyl Canthin-6-one-2-carboxylate （Cant）是我们最近研究中发现的铁屎米酮（canthin-6-one）的一种新型吲哚生物碱衍生物。先前的研究表明，几种铁屎米酮衍生物具有多种生物活性，包括通过各种机制抑制糖尿病和炎症性肠病等许多疾病中的炎症。然而，Cant在炎症反应中的作用尚不清楚。在本研究中，我们探讨了Cant对 FLS 功能的影响。通过Transwell迁移/侵袭实验，细胞划痕实验，WB, qPCR和ELISA等实验发现，Cant 以剂量依赖性方式显着抑制 RA-FLS 迁移和侵袭特性。同时，Cant 预处理对几种促炎细胞因子的释放也有抑制作用，包括 IL-6 和 IL-1β，以及 MMP1和 MMP3 的产生，它们是FLS侵袭的重要介质。在进一步的机制研究中，我们发现Cant对 Hippo/YAP 信号通路有抑制作用。Cant 处理抑制了YAP在丝氨酸 127 和丝氨酸 397 上的表达和磷酸化，同时增强了LATS1和MST1水平，两者都是YAP的重要上游调节因子。此外，YAP特异性siRNA或YAP抑制显着抑制伤口愈合以及 FLS 细胞的迁移和侵袭速率，其影响类似于Cant治疗。同时，YAP的过表达显著逆转了Cant诱导的FLS细胞迁移和侵袭的下降，表明YAP是Cant对FLS细胞迁移和侵袭的抑制作用所必需的。此外，在培养上清液中添加MMP1而不是 MMP3可显着逆转 Cant对FLS细胞侵袭的抑制作用。我们的数据共同表明，Cant 可能通过抑制 YAP信号通路抑制 MMP1的产生来抑制 RA-FLS迁移和侵袭，这表明 Cant具有进一步开发抗 RA 药物的潜力。总之，我们的研究调查了一种新型 canthin-6-one生物碱Cant对RA-FLS细胞功能的影响。我们的数据提供了证据，表明Cant可以抑制 RA-FLS 细胞的促炎功能，包括迁移、侵袭以及 MMP 和促炎细胞因子的产生。对于机制，Cant的抑制作用是通过抑制 Hippo/YAP 信号通路来实现的。据我们所知，这是第一项描述 canthin-6-one化合物家族对RA-FLS 细胞影响的研究。文献中也未报道Cant对Hippo/YAP 信号通路的抑制作用。我们的研究结果共同表明，Cant可能通过靶向RA-FLS细胞的炎症功能成为进一步开发RA治疗药物的有前途的候选者。